Гель-электрафарэз ДНК: аналіз генетычных фрагментаў

Электрафарэз у гелі ДНК - гэта распаўсюджаны метад малекулярнай біялогіі, які выкарыстоўваецца для падзелу і аналізу фрагментаў ДНК у залежнасці ад іх памеру. Працэс прадугледжвае загрузку фрагментаў ДНК рознага памеру ў гель, зроблены з агарозы, вуглявода, які змяшчаецца ў чырвоных водарасцях.

Падрыхтоўка і адліўка агарозного геля

  1. Растворыце агарозу ў адпаведнай колькасці буфера для электрафарэзу. Канцэнтрацыя геля вызначаецца суадносінамі масы да аб'ёму, напрыклад, 1 г агарозы на 100ml буфера для 1% геля.
  2. Нагрэйце сумесь у мікрахвалевай печы, круцячы ёмістасць да поўнага растварэння агарозы.
  3. Дадайце ў раствор геля бромісты этидий да канчатковай канцэнтрацыі 0,5мг/ ml. Брамісты этыдый устаўляецца паміж суседнімі парамі асноў ДНК і выпраменьвае аранжавую флуарэсцэнцыю пад ультрафіялетавым святлом. Звярніце ўвагу, што брамісты этыдый з'яўляецца канцэрагенам, таму пры працы з ім неабходна выконваць належныя меры бяспекі, напрыклад насіць пальчаткі.
  4. Астудзіце раствор геля на вадзяной лазні, каб паддон з гелем не дэфармаваўся ад высокай тэмпературы.
  5. Змесціце расчоскі ў раствор геля, каб сфармаваць лункі для ўзору. Выберыце расчоскі, прыдатныя для колькасці ўзору ДНК, які вы будзеце загружаць. Наліце ​​​​раствор агарознага геля ўлаток з гелемі дайце яму застыць пры пакаёвай тэмпературы.
  6. Як толькі гель застыгне, прыбярыце расчоскі. Калі вы не збіраецеся выкарыстоўваць гель адразу, загарніце яго ў поліэтыленавую плёнку і захоўвайце пры тэмпературы 4℃, пакуль не спатрэбіцца.

Падрыхтоўка і запуск геля

Перад пачаткам электрафарэзу змяшайце ўзор ДНК з загрузачным буферам. Буфер загрузкі звычайна ў шэсць разоў больш канцэнтраваны і дапамагае ўзору апускацца на дно лунак і адсочваць рух падчас электрафарэзу.

Усталюйце блок харчавання на зададзенае напружанне.

Дадайце ў рэзервуар з гелем дастатковую колькасць буфера для электрафарэзу, каб пакрыць паверхню геля.Забяспечыцьправільнае злучэнне электродаў.

Загрузіце ўзор ДНК і маркеры малекулярнай масы ў гелевыя лункі.

Уключыце сілкаванне, каб пачаць электрафарэз.

Назіранне за аддзеленымі фрагментамі ДНК

Пасля правядзення электрафарэзу адключыце электрасілкаванне і выдаліце ​​гель.

Для асвятлення геля выкарыстоўвайце крыніцу ультрафіялетавага святла; Фрагменты ДНК будуць выглядаць у выглядзе аранжавых флуоресцентных палос.

Задакументуйце выяву геля для аналізу аддзеленых фрагментаў ДНК.

Пасля эксперыменту забяспечце належную ўтылізацыю геля і буфера для электрафарэзу ў адпаведнасці з інструкцыямі лабараторыі. Заўсёды апранайце пальчаткі пры працы з гелямі і буферамі, якія змяшчаюць брамісты этыдый, каб засцерагчыся ад уздзеяння гэтага небяспечнага рэчыва.

Электрафарэз у гелі ДНК шырока выкарыстоўваецца ў малекулярнай біялогіі і генетычных даследаваннях для ацэнкі памераў малекул ДНК, падзелу фрагментаў ДНК, выяўлення генных мутацый і дактыласкапіі ДНК, сярод іншых прыкладанняў. Гэта просты і эфектыўны эксперыментальны метад, які дапамагае зразумець склад і характарыстыкі узораў ДНК.

Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, прафесійны вытворца, які спецыялізуецца на прадуктах для электрафарэзу больш за 50 гадоў, прапануе шырокі выбар рэзервуараў для электрафарэзу (камеры/ячэйкі) для гелевага электрафарэзу, такія як рэзервуары для гарызантальнага электрафарэзу (камеры/ячэйкі) дляДНКэлектрафарэзу ў гелі і вертыкальныя рэзервуары для электрафарэзу (камеры/ячэйкі) для электрафарэзу ў бялковым гелі. Між тым, ён таксама забяспечвае розныя тыпы электрафарэзу, аналізатар цёмнай скрыні і УФ-трансілюмінатар. Вы можаце выбраць рэзервуары для электрафарэзу Beijing Liuyi (камеры/ячэйкі) для вымярэння малекулярнай масы РНК і падзелу РНК розных памераў для вашай лабараторыі.

Вось і будземрэкамендавацьадзін тып мадэлі бака для гарызантальнага электрафарэзу (камера/ячэйка).DYCP-31DN каб зрабіць і запусціць гель.

1

Пасля запуску геля вы можаце выкарыстоўваць нашу мадэль выявы геля і сістэмы аналізуWD-9413Bназіраць, аналізаваць і рабіць здымкі для геля. Liuyi Biotech таксама прапануе УФ-трансілюмінатар (УФ-аналізатар) для назірання за гелем. У нас ёсць мадэль УФ-трансілюмінатара (УФ-аналізатар) тыпу чорнай скрыніWD-9403A,9403C,WD-9403F, партатыўная мадэль УФ-трансілюмінатара (УФ-аналізатар).WD-9403Bі ручной УФ-трансілюмінатар (УФ-аналізатар)WD-9403Eна ваш выбар.

2

Брэнд Beijing Liuyi мае больш чым 50-гадовую гісторыю ў Кітаі, і кампанія можа пастаўляць стабільную і якасную прадукцыю па ўсім свеце. Дзякуючы шматгадовым распрацоўкам, ён варты вашага выбару!

Зараз мы шукаем партнёраў, вітаем як бакі для электрафарэзу OEM, так і дыстрыб'ютараў.

Калі ў вас ёсць план пакупкі нашых прадуктаў, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас. Вы можаце адправіць нам паведамленне па электроннай пошце[электронная пошта абаронена]або[электронная пошта абаронена], або патэлефануйце нам па нумары +86 15810650221 або дадайце WhatsApp +86 15810650221 або WeChat: 15810650221.


Час публікацыі: 8 жніўня 2023 г