Уводзіны
Гель-электрафарэз - фундаментальны метад у малекулярнай біялогіі, які шырока выкарыстоўваецца для падзелу бялкоў, нуклеінавых кіслот і іншых макрамалекул. Правільны кантроль аб'ёму ўзору, напружання і часу электрафарэзу мае вырашальнае значэнне для дасягнення дакладных і ўзнаўляемых вынікаў.Наш калега па лабараторыі прапануелепшыя практыкі для кіравання гэтымі параметрамі падчас электрафарэзу ў гелі SDS-PAGE.
Пекін Liuyi Biotechnology гель электрафарэз прадукты
Аб'ём выбаркі: забеспячэнне кансістэнцыі
Пры выкананні электрафарэзу SDS-PAGE аб'ём пробы з'яўляецца ключавым фактарам, які можа істотна паўплываць на разрозненне вынікаў. Звычайна рэкамендуецца загружаць 10 мкл агульнага бялку на лунку. Для забеспячэння ўзгодненасці і прадухілення дыфузіі ўзораў паміж суседнімі лункамі важна загрузіць аднолькавы аб'ём загрузнага буфера 1x у любыя пустыя лункі. Гэтая мера засцярогі дапамагае прадухіліць распаўсюджванне проб на суседнія дарожкі, што можа адбыцца, калі калодзеж пусты.
Перад загрузкай узораў заўсёды пачынайце з дадання маркера малекулярнай масы ў адну лунку. Гэта дазваляе лёгка вызначыць памер бялку пасля электрафарэзу.
Кантроль напружання: балансаванне хуткасці і дазволу
Напружанне, якое ўжываецца падчас электрафарэзу, непасрэдна ўплывае як на хуткасць, з якой пробы мігруюць праз гель, так і на дазвол падзелу. Для SDS-PAGE пажадана пачынаць з нізкага напружання каля 80 В. Гэта першапачатковае нізкае напружанне дазваляе ўзорам павольна і раўнамерна міграваць, канцэнтруючы іх у рэзкую паласу, калі яны трапляюць у раздзяляльны гель.
Як толькі ўзоры цалкам увайшлі ў раздзяляльны гель, напружанне можна павялічыць да 120 В. Гэта больш высокае напружанне паскарае міграцыю, забяспечваючы эфектыўнае падзеленне бялкоў у адпаведнасці з іх малекулярнай масай. Неабходна сачыць за ходам фронту фарбавальніка бромфенолового сіняга, які паказвае на завяршэнне электрафарэзу. Для геляў з канцэнтрацыяй 10-12% звычайна дастаткова 80-90 хвілін; аднак для 15% геляў вам можа спатрэбіцца трохі падоўжыць час працы.
Кіраванне часам: ведаць, калі спыніцца
Час - яшчэ адзін важны фактар пры гелевым электрафарэзе. Ужыванне геля занадта доўга або занадта каротка можа прывесці да неаптымальнага аддзялення. Міграцыя бромфенолового сіняга фарбавальніка з'яўляецца карысным індыкатарам: калі ён дасягае дна геля, звычайна надыходзіць час спыніць працу. Для стандартных геляў, такіх як 10-12%, звычайна дастаткова электрафарэзу каля 80-90 хвілін. Для геляў з больш высокім адсоткам, напрыклад, 15%, час працы павінен быць падоўжаны, каб забяспечыць поўнае аддзяленне бялкоў.
Кіраванне буферамі: паўторнае выкарыстанне і падрыхтоўка буфераў
Буфер для электрафарэзу можна выкарыстоўваць паўторна 1-2 разы ў залежнасці ад канкрэтных умоў вашай лабараторыі. Аднак для дасягнення аптымальных вынікаў рэкамендуецца рыхтаваць свежы 10-кратны буфер і разводзіць яго непасрэдна перад выкарыстаннем. Гэта гарантуе, што буфер захоўвае сваю эфектыўнасць, што прыводзіць да больш надзейных вынікаў электрафарэзу.
Пекін Liuyi Biotechnology гель электрафарэз прадукты
Старанна кантралюючы аб'ём пробы, напружанне і час электрафарэзу, вы можаце значна палепшыць дакладнасць і ўзнаўляльнасць вынікаў гелевага электрафарэзу. Укараненне гэтых лепшых практык у вашай лабараторнай рабоце дапаможа вам дасягнуць больш выразных і выразных палос, што прывядзе да атрымання больш якасных даных для далейшага аналізу.
Калі ў вас ёсць больш добрых метадаў для аптымізацыі эксперыменту з гелевым электрафарэзам, запрашаем абмеркаваць з намі!
Кампанія Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) больш за 50 гадоў спецыялізуецца на вытворчасці прыбораў для электрафарэзу з нашай уласнай прафесійнай тэхнічнай групай і цэнтрам даследаванняў і распрацовак. У нас ёсць надзейная і поўная вытворчая лінія ад праектавання да праверкі, склад, а таксама маркетынгавая падтрымка. Нашай асноўнай прадукцыяй з'яўляюцца ячэйка для электрафарэзу (бак/камера), крыніца харчавання для электрафарэзу, сіні святлодыёдны трансілюмінатар, УФ-трансілюмінатар, гелевая сістэма выявы і аналізу і г. д. Мы таксама пастаўляем лабараторныя інструменты, такія як прыбор ПЦР, віхравы змяшальнік і цэнтрыфуга для лабараторыі.
Калі ў вас ёсць план пакупкі нашых прадуктаў, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас. Вы можаце адправіць нам паведамленне па электроннай пошце[электронная пошта абаронена]або[электронная пошта абаронена], або патэлефануйце нам па нумары +86 15810650221 або дадайце WhatsApp +86 15810650221 або WeChat: 15810650221.
Адсканіруйце QR-код, каб дадаць яго ў Whatsapp або WeChat.
Час публікацыі: 20 жніўня 2024 г