Гель-электрафарэз - адзін з асноўных метадаў малекулярнай біялогіі для аналізу ДНК.Гэты метад прадугледжвае міграцыю фрагментаў ДНК праз гель, дзе яны падзяляюцца ў залежнасці ад памеру або формы.Тым не менш, вы калі-небудзь сутыкаліся з якімі-небудзь памылкамі падчас эксперыментаў з электрафарэзам, такімі як змазванне палос на агарозным гелі або адсутнасць палос на гелі?Што можа быць прычынай гэтых памылак?
Нашы спецыялісты абагульнілі тут для вашай даведкі некалькі спосабаў ліквідацыі непаладак.
1. Намазаныя палоскі на агарозном гелі
●ДНК дэградавала.Пазбягайце заражэння нуклеазамі.
● Буфер для электрафарэзу не свежы.Пасля шматразовага выкарыстання буфера для электрафарэзу іённая сіла зніжаецца, а значэнне рн павялічваецца, таму буферная ёмістасць саслабляецца, што адбіваецца на эфекце электрафарэзу.Рэкамендуецца часта замяняць буфер для электрафарэзу.
● Былі выкарыстаны няправільныя ўмовы электрафарэзу.Не дазваляйце напружанню перавышаць 20 В/см і падтрымлівайце тэмпературу <30° C падчас электрафарэзу.Для электрафарэзу гіганцкай ланцуга ДНК тэмпература павінна быць <15°C. Праверце, ці дастаткова буфера для электрафарэзу.
● У гель было загружана занадта шмат ДНК.Паменшыць колькасць ДНК.
● Занадта шмат солі ў ДНК.Выкарыстоўвайце асаджэнне этанолам для выдалення лішку соляў у прасунутым рэжыме.
● ДНК была заражаная бялком.Выкарыстоўвайце экстракты фенолу для выдалення бялку ў прасунутых.
● ДНК была дэнатураваная.Не награвайце перад электрафарэзам.Развядзіце ДНК у буферы з 20 мМ NaCl.
2. Анамаліі міграцыі палос ДНК
● Рэнатурацыя сайта COS фрагмента λHind III.Награвайце ДНК на працягу 5 хвілін пры тэмпературы 65°C перад электрафарэзам, а затым астудзіце яе на лёдзе на працягу 5 хвілін.
● Былі выкарыстаны няправільныя ўмовы электрафарэзу.Не дазваляйце напружанню перавышаць 20 В/см і падтрымлівайце тэмпературу <30° C падчас электрафарэзу.Праверце, ці дастаткова буфера для электрафарэзу.
● ДНК была дэнатураваная.Не награвайце перад электрафарэзам.Развядзіце ДНК у буферы з 20 мМ NaCl.
3. Слабыя або адсутныя палосы ДНК на агарозным гелі
● Была недастатковая колькасць або канцэнтрацыя ДНК, загружанай у гель.Павялічыць колькасць ДНК.Электрафарэз у поліакрыламідным гелі крыху больш адчувальны, чым электрафарэз у агарозе, і загрузку ўзору можна адпаведным чынам паменшыць.
● ДНК дэградавала.Пазбягайце заражэння нуклеазамі.
● ДНК была падвергнута электрафарэзу з геля.Электрафарэз геля на працягу меншага часу, выкарыстоўвайце больш нізкае напружанне або выкарыстоўвайце больш высокі працэнт геля.
● Для візуалізацыі ДНК, афарбаванай брамістым этыдыем, выкарыстоўвалася няправільная крыніца святла W.Выкарыстоўвайце святло з кароткай даўжынёй хвалі (254 нм) W для большай адчувальнасці.
4. Адсутнічаюць паласы ДНК
●ДНК невялікага памеру была падвергнута электрафарэзу з геля.Электрафарэз геля на працягу меншага часу, выкарыстоўвайце больш нізкае напружанне або выкарыстоўвайце больш высокі працэнт геля.
● Цяжка адрозніць паласы ДНК падобнай малекулы.Павялічце час электрафарэзу і праверце канцэнтрацыюгеля, каб пераканацца ў правільным адсотку геля, які трэба выкарыстоўваць.
● ДНК была дэнатураваная.Не награвайце перад электрафарэзам.Развядзіце ДНК у буферы з 20 мМ NaCl.
● Ніткі ДНК велізарныя, і звычайны электрафарэз у гелі не падыходзіць.Аналіз на імпульсным гель-электрафарэзе.Якія яшчэ праблемы ўзнікалі ў вас пры электрафарэзе ў агарозным гелі?У будучыні мы будзем шукаць больш гідаў.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) - гэта спецыялізаваная кампанія, якая спецыялізуецца на электрафарэзных прадуктах у Кітаі.Яго гісторыя пачынаецца ў 1970 годзе, калі Кітай яшчэ не ўступіў у рэформы і час адкрыцця.Дзякуючы шматгадоваму развіццю, Liuyi Bitotech мае свой уласны брэнд, які на ўнутраным рынку прадуктаў для электрафарэзу вядомы як брэнд Liuyi.
Брэнд Liuyi мае больш чым 50-гадовую гісторыю ў Кітаі, і кампанія можа пастаўляць стабільную і якасную прадукцыю па ўсім свеце.Праз гады развіцця, гэта варта вашага выбару!
Ячэйкі для гарызантальнага электрафарэзу (рэзервуары/камеры) Liuyi Biotech маюць высокую якасць і прыгожы знешні выгляд.Дзякуючы розным памерам гелевых латкоў, яны могуць адпавядаць вашым розным эксперыментальным патрабаванням.У нас ёсць уласная тэхнічная група і завод.Ад праектавання да вытворчасці, ад сыравіны да ключавых частак, мы можам кантраляваць увесь працэс.Серыя DYCP 31 прызначана для электрафарэзу ДНК, які з'яўляецца мадэллюDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, іDYCP-31E.Адрозніваюцца паміж сабой памеры геляў і кошт.Мы прапануем поўны памер прадукцыі для нашых кліентаў.МадэльDYCP-32Cможа зрабіць самы вялікі гель 250 мм * 250 мм.
Тым часам мы рэкамендуем наш блок харчавання для электрафарэзуDYY-6C,ДЫГ-6ДіDYY-10Cдля нашых электрафарэзных ячэек (рэзервуараў/камер) серый DYCP-31 і 32.
Калі вы хочаце атрымаць дадатковую інфармацыю аб прадуктах, калі ласка, наведайце гэты вэб-сайт, каб атрымаць больш, і можаце звязацца з намі па электроннай пошце, каб паведаміць нам, што вы хочаце, і даведацца, ці зможам мы даць вам рашэнні.
Для атрымання дадатковай інфармацыі пра нас, калі ласка, звяжыцеся з намі па электроннай пошце[электронная пошта абаронена], [электронная пошта абаронена].
Час размяшчэння: 9 мая 2022 г